Kienlen-Campard, PascalDeltenre, LouiseLouiseDeltenre2025-05-142025-05-142025-05-142023https://hdl.handle.net/2078.2/31320La maladie d’Alzheimer (MA) est la cause la plus commune de démence. C’est une maladie neurodégénérative qui se caractérise par une perte progressive de la mémoire et des capacités cognitives, menant à une perte d’indépendance et à la démence des personnes atteintes. L’évolution de la maladie s’étend sur plusieurs années, incluant une première phase dite asymptomatique durant laquelle les différentes lésions caractéristiques de la maladie s’accumulent ; les dégénérescences neurofibrillaires (DNFs) formées de protéines Tau, et les plaques séniles formées par l’agrégation progressive extracellulaire de peptides 𝛽- amyloïdes. Ces peptides sont formés à partir du clivage séquentiel de l’APP (Protéine précurseur de l’amyloïde) dans la voie amyloïdogène par une 𝛽-sécrétase et une γ-sécrétase. Ce clivage peut générer différentes formes d’A𝛽 dans différents compartiments cellulaires. Les monomères d’A𝛽 formés vont s’auto-associer pour former les plaques séniles. Plusieurs études suggèrent que ce sont les oligomères solubles d’A𝛽 qui sont toxiques et non les espèces fibrillaires, et que ces assemblages sont libérés dans le milieu au sein des vésicules extracellulaires. Sur base de cette hypothèse, tout en sachant que le clivage de l’APP au sein des compartiments endocytaire génère un pool d’A𝛽 plus long et plus propice à l’agrégation, nous tenterons de caractériser la présence de peptides 𝛽-amyloïde assemblés (oligomères) au sein des vésicules extracellulaires (VE). Afin de tester cette hypothèse, différentes cultures cellulaires (cellules ovariennes de hamster chinois et cellules dérivées de neuroblastomes humains) ont été transfectées afin de surexprimer le peptide 𝛽-amyloïde et le peptide CTF-𝛽. La pathologie amyloïde sera également évaluée dans les vésicules extracellulaires isolées de plasma d’individus cognitivement normaux et de patients atteints de la maladie d’Alzheimer. Nos résultats montrent que dans notre modèle, les vésicules contiennent différents constituants du clivage séquentiel de l’APP. Ces preuves suggèrent que les altérations physiopathologiques de la MA pourraient se refléter dans la composition des vésicules extracellulaires produites dans le cerveau. La barrière hémato-encéphalique étant perméable au passage de l’A𝛽 et des vésicules, le contenu de celles-ci pourrait refléter avec précision l’état de la pathologie amyloïde dans le sang. Ces résultats sont en faveur de l’utilisation de vésicules sanguines comme un potentiel outil de diagnostic précoce. Différents échantillons de vésicules extracellulaires plasmatiques ont été analysés par Western blot et par Single Molecule Array afin d’en analyser leur contenu. Une différence dans le contenu vésiculaire a été observé par Western blot entre un patient contrôle et un patient malade. L’analyse quantitative a révélé la présence de peptide 𝛽-amyloïde et de protéines Tau dans les vésicules dérivées du système nerveux central. Ces derniers résultats encouragent notre hypothèse de départ et soulignent l’intérêt de l’étude des vésicules extracellulaires dans la maladie d’AlzheimerAlzheimerVésicules extracellulairesDiagnosticBiomarqueurstext::thesis::master thesisthesis:38894