Decottignies, AnabelleDerumier, AmélieAmélieDerumier2025-05-142025-05-142025-05-142023https://hdl.handle.net/2078.2/31328La sénescence cellulaire, caractérisée par un arrêt du cycle cellulaire, peut résulter d’une érosion des télomères au fil des divisions cellulaires (sénescence réplicative), ou être induite prématurément sous certaines conditions, telles que du stress oxydatif ou génotoxique. Les chimio- et radiothérapies sont très souvent associées à l’apparition de dysfonctionnements multiples des organes, suggérant un vieillissement prématuré de l’organisme. Notre objectif premier est d’évaluer si les traitements actuels pour les cancers pédiatriques accélèrent la sénescence des cellules saines. Dans ce but, nous avons mis au point un prélèvement peu invasif de cellules saines non-sanguines via frottis nasal afin d’analyser des marqueurs de sénescence cellulaire. Pour établir les références dans la population saine, nous avons déjà recruté 74 sujets contrôles, âgés de 7 à 94 ans, et effectué des tests d’activité de l’enzyme lysosomiale, bêta-galactosidase liée à la sénescence (SA-ß-gal). Nous avons également quantifié les transcrits de p16 et p21 ainsi que ceux du SASP (Phénotype Sécrétoire Associé à la Sénescence) par qRT-PCR et analysé les dommages à l’ADN au niveau des télomères par combinaison de FISH télomérique et d’immunofluorescence. Si les cellules normales peuvent subir le phénomène de sénescence réplicative, la majorité des cellules cancéreuses y échappe en activant un des deux mécanismes qui permettent le maintien des télomères : la télomérase ou le mécanisme alternatif de maintien des télomères (ALT). Le deuxième objectif du mémoire est l’analyse du mécanisme de maintien des télomères de tumeurs pédiatriques dans le but, à plus long terme, de promouvoir le développement de nouvelles molécules anti-ALT pour des thérapies idéalement moins toxiques. L’activation de la télomérase se détecte par quantification des transcrits de hTERT, sa sous-unité catalytique. La mise en évidence du mécanisme ALT se réalise par une FISH télomérique native et une FISH télomérique classique. Le troisième objectif est l’établissement de lignées cellulaires à partir de ces tumeurs pour pouvoir, à long terme, tester de nouvelles thérapies ciblées qui présenteraient moins d’effets néfastes sur les cellules saines.Cancervieillissement prématurésénescence cellulairefrottis nasaltélomèretext::thesis::master thesisthesis:38893