La sécrétion des Yops par Yersinia

Details

Supervisors

Cornelis, Guy

Faculty

Faculté de médecine et médecine dentaire

Degree label

Sciences Biomédicales

Abstract

Le pouvoir pathogène de Yersinia réside essentiellement dans sa capacité à empêcher sa propre phagocytose par les cellules immunitaires du système réticuloendothélial à l’égard duquel s’exerce son tropisme. Cette faculté est due au virulon Yop codé par le plasmide de virulence pYV. Le virulon permet à la bactérie adhérant à l’extérieur du phagocyte de sécréter et d’injecter dans le cytoplasme de celui-ci des protéines Yops antiphagocytaires. Le virulon est constitué de trois éléments : une machinerie de sécrétion comptant une vingtaine de protéines Ysc (YscA à YscW), un système de translocation dans les cellules eucaryotes composé d’une partie des protéines sécrétées (YopB et YopD), et une série de protéines Yops effectrices (YopE, YopH, YopM et YopO). Les deux protéines antiphagocytaires YopE et YopH comportent trois domaines successifs : un signal de sécrétion N-terminal, un domaine de translocation dans les cellules eucaryotes et un domaine catalytique. La sécrétion de YopE et de YopH nécessite, outre la machinerie Ysc, une interaction transitoire avec des protéines cytoplasmiques appelées SycE et SycH (pour "Spécifie Yop Chaperone”). L’absence de similarité entre les signaux de sécrétion des différentes Yops a fait suggérer que ces chaperons pouvaient être des facteurs pilotes menant leur Yop partenaire à la machinerie de sécrétion. La première partie du travail concerne deux protéines de la machinerie de sécrétion Ysc, YscN et YscU. Dans la deuxième partie, consacrée à la sécrétion des protéines YopE et YopH, la fonction des chaperons SycE et SycH est clarifiée. Comme tout système de sécrétion, la machinerie Ysc comprend une protéine contenant un domaine de fixation à l’ATP, YscN (Woestyn et col., 1994). Le retrait du motif de liaison, par mutagenèse dirigée, a montré que la fixation de l’ATP est essentielle à la sécrétion des Yops. YscN, homologue à de nombreuses protéines hydrolysant l’ATP (en particulier la sous-unité catalytique [3 des différentes ATPases F0F1), est sans doute le moteur de la machinerie de sécrétion. Seules quelques protéines Ysc ont été localisées avec précision; YscU est l’une d’entre elles. Cette protéine indispensable à la sécrétion est ancrée à la membrane interne de la bactérie par quatre domaines transmembranaires N-terminaux (Allaoui et col., 1994). L’étude de la fixation des chaperons SycE et SycH à leur protéine partenaire a montré qu’un seul domaine de la protéine Yop est reconnu (acides aminés 15 à 50 pour YopE et acides aminés 20 à 70 pour YopH) (Woestyn et col., 1996). Le domaine de fixation est situé immédiatement après le signal de sécrétion et correspond au domaine de translocation dans les cellules eucaryotes. Le retrait de ce domaine bifonctionnel ne perturbe pas la sécrétion de YopE ou de YopH et permet aux protéines de devenir indépendantes du chaperon pour leur sécrétion. Les protéines SycE et SycH ne sont donc pas des pilotes, mais sans doute des facteurs d’antiassociation empêchant l’interaction de YopE et de YopH avec des protéines impliquées dans leur translocation dans la cellule eucaryote (par exemple, les translocateurs YopB et YopD).