Caractérisation de lignées thyroïdiennes et de leurs vésicules extracellulaires

Details

Supervisors

Pierreux, Christophe

Faculty

Faculté de pharmacie et des sciences biomédicales

Degree label

Master [120] en sciences biomédicales, à finalité approfondie

Abstract

Le laboratoire d’accueil étudie les communications intercellulaires qui contrôlent le développement d’organes épithéliaux comme la glande thyroïde, ainsi que les dysfonctionnements touchant ces organes tel que le cancer thyroïdien. À l’aide d’un modèle murin dans lequel l’expression de l’oncogène B-RAFV600E est spécifiquement induite dans les thyrocytes, le laboratoire a identifié des micro-ARNs encapsulés dans des vésicules extracellulaires (EVs) libérées par le tissu thyroïdien tumoral. Pour soutenir ces recherches, ce mémoire visait à caractériser des lignées issues de cancer thyroïdien papillaire (PTC) et les EVs produites par ces dernières afin de disposer d’un modèle d’étude manipulable. Trois lignées cellulaires thyroïdiennes ont été choisies : les cellules Nthy-ori, ne portant pas de mutation connue, qui sont considérées comme lignée contrôle, les cellules BCPAP qui portent la mutation B-RAFV600E, et les cellules TPC-1 qui ont subi une translocation RET/PTC. Le premier axe du travail s’est focalisé sur l’activation de la voie MAPK/ERK au sein de ces 3 lignées. En effet, les mutations identifiées dans les PTC conduisent in vivo à l’activation de cette voie. Contrairement aux attentes basées sur le statut mutationnel des lignées, aucune activation significative de cette voie n’est observée dans les cellules cancéreuses par rapport à la lignée contrôle. Cependant, nous remarquons une faible augmentation des gènes cibles de la voie des MAPK dans les lignées cancéreuses. Le second volet de ce travail consistait à mettre en place un protocole afin de caractériser les EVs libérées par ces différentes lignées cellulaires thyroïdiennes. Nous avons d’abord mesuré la production d’EVs par ces lignées et mis en évidence des marqueurs protéiques vésiculaires. Nos analyses indiquent que la population d’EVs récoltées est majoritairement de type exosomale, et que, à l’inverse de ce qui est décrit dans la littérature, les lignées cancéreuses BCPAP et TPC-1 ne produisent pas plus d’EVs que la lignée contrôle Nthy-ori. Ensuite, nous avons mesuré l’expression des micro-ARNs candidats, identifiés dans les EVs du modèle murin, dans les cellules et les vésicules produites par ces dernières. La présence de 8 micro-ARNs candidats a pu être démontrée dans nos lignées. Suite à ces expériences, je suggèrerais de continuer d’étudier le PTC avec la lignée BCPAP.